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中草药免疫增强剂的作用及在养猪上研究概况

放大字体  缩小字体 发布日期:2016-03-01  来源:兽药市场指南  作者:单冬丽  浏览次数:1703在线投稿
新形势下猪传染病发生的特点和变化,免疫抑制性疾病危害加大,造成疫苗免疫效果下降甚至失败,严重影响了养

新形势下猪传染病发生的特点和变化,免疫抑制性疾病危害加大,造成疫苗免疫效果下降甚至失败,严重影响了养猪业的健康发展。免疫增强剂具有提高机体免疫系统功能,增强机体抗病力,减少疾病发生等特点,近年来对免疫增强剂的研究逐渐增多,研制和开发出了多种免疫增强剂应用于养猪生产,但是化学药物免疫增强剂存在毒副作用和药物残留弊端,中草药免疫增强剂对机体具有双向调节作用,无毒副作用和药物残留,因此成为十分活跃的研究领域。

一、中草药免疫增强剂的作用机理

1.对免疫器官的促进作用

猪免疫器官主要由中枢免疫器官胸腺和外周免疫器官脾脏及淋巴组织等组成,是猪发挥免疫功能的组织机构。中草药免疫增强剂能促进胸腺和脾脏的生长,使胸腺和脾脏增重,延缓它们的衰老,从而提高机体免疫活性,解除氢化可的松引起的免疫抑制。毛小娟(1988)实验证明,红芪多糖或黄芪多糖可明显增加小鼠脾重,而使胸腺重量减轻,后者以红芪多糖组最为明显;同时红芪多糖或黄芪多糖对强的松龙所致的脾、胸腺重量的减轻有明显的对抗作用 

王建文(1991)报道,黄芪多糖能增加正常小鼠脾脏重量,完全对抗皮质激素引起的胸腺及肠淋巴结萎缩,并可对抗环磷酰胺造成的脾脏重量下降。彭远羲等(1995)用中草药仔猪白痢散(由黄芪、白术等组成)注射液0.1ml/只腹腔注射小白鼠,每天 1次,连续7d,结果药物组脾脏系数明显大于注射生理盐水的对照组,说明仔猪白痢散可促进脾脏细胞增生,具有增加脾重的作用,这也许是该制剂提高机体免疫功能的途径之一 

王杰等(1997)用刺五加叶皂甙按50、100、200mg/kg体重给小鼠腹腔注射,连续7d,可使正常及免疫抑制小鼠的胸腺及脾脏重量明显增加,并大大增强小鼠网状内皮系统的吞噬功能 。王纬等(2000)报道,红芪总皂甙能显著提高被环磷酰胺抑制的机体免疫功能,与环磷酰胺组相比,红芪总皂甙组的小鼠胸腺指数和脾脏指数均显著增加;腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数显著增加;细胞的免疫黏附作用明显改善 

刘惠等(2007)测定发现中草药多糖(白术、黄柏、党参、苍术、陈皮、山楂、马齿苋)能提高断奶仔猪增重和免疫器官指数(腹股沟淋巴结、肝脏、脾脏、肾脏及胸腺),复合多糖对断奶仔猪生长性能和免疫器官指数的提高均优于单一多糖和抗生素,且以在饲粮中添加0.6%和0.9%的中草药复合多糖效果较好 

2.对非特异性免疫的增强作用

非特异性免疫主要是机体单核巨噬细胞系统的各种巨噬细胞产生的非针对特定病原体的防御机能,其功能的提高主要是通过增加吞噬细胞数目和吞噬能力来实现的。中草药免疫增强剂能刺激单核巨噬细胞系统,增强机体吞噬异物能力,诱导产生白细胞介素。王天然(1991)观察了淫羊藿多糖对小白鼠腹腔巨吞噬细胞吞噬功能和脾脏淋巴细胞自发细胞毒作用的影响,淫羊藿多糖(40mg/kg/d)组小鼠巨噬细胞吞噬功能比对照增强约1倍(P<0.001),淋巴细胞自发细胞毒作用增强50%(P<0.01),结果表明淫羊藿多糖对巨噬细胞和淋巴细胞免疫功能具有增强作用 

何维明等(1995)给小鼠分别饲喂10%水飞蓟、20%水飞蓟、环磷酰胺(0.01g/kg)和空白对照(常规饲料),结果证明,水飞蓟各剂量组能极显著增高小鼠外周血白细胞数目,提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率及吞噬指数,并随剂量加大有增强的趋势;能促进小鼠淋巴细胞转化,提高淋巴细胞转化百分率;对小鼠免疫器官重量和血清凝集素抗体的形成无明显作用 

刘家国等(2001)观察了淫羊藿-蜂胶佐剂 (简称淫峰佐剂 )对小鼠和雏鸡的NK细胞活性、腹腔巨噬细胞活性及血浆cAMP、cGMP含量等非特异免疫功能的影响,结果小鼠NK细胞活性,淫蜂佐剂组>生理盐水对照组>淫蜂佐剂+环磷酰胺组>环磷酰胺组,上述各组间差异显著或极显著,这种差异4周龄小鼠较 8周龄小鼠更为明显;小鼠腹腔巨噬细胞活性检测结果与之相似;雏鸡 NK细胞活性、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数以及c GMP/ c AMP比值均显著或极显著高于注射生理盐水对照雏鸡,且0.4ml/只组高于0.2ml/只组。表明淫蜂佐剂能增强实验动物非特异免疫功能,并拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用;对免疫系统未成熟的幼龄动物作用尤佳 

刘俊栋等(2005)研究表明,当归多糖通过活化巨噬细胞作用于各种免疫效应细胞,产生相应的细胞因子从而实现其免疫作用;对淋巴细胞也有较强的活化作用,能提高IL-2和免疫球蛋白IgG、IgM、补体C5的水平 。谢红兵等(2006)在断奶仔猪基础日粮中添加中草药免疫增强剂(由绞股蓝、茵陈、板蓝根和甘草四味中药组配而成),能明显改善断奶仔猪的生产性能,血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白和免疫球蛋白IgA、IgM、IgG及补体C3、C4的含量,IL-2、γ-IFN的含量等均有显著的提高;CD3、CD4、CD8含量均无显著变化,但CD4/CD8的比值差异极显著  

尹富贵等(2007)饲喂添加0.2%中草药复方能显著提高断奶仔猪外周血白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞计数、超氧化物歧化酶活性及中性粒细胞和单核细胞百分率;显著降低丙二醛和一氧化氮含量,提示所用中草药复方可显著增强断奶仔猪的免疫功能、减轻炎性反应及断奶应激造成的损伤。

周淑兰等(2008)用精制芦荟多糖以不同剂量连续多次给小白鼠后腿肌肉注射后,高剂量(每只每天4 mg)芦荟多糖能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数,而低剂量组(每只每天2 mg)对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数没有影响;表明芦荟多糖能明显提高单核吞噬细胞的功能,从而增强机体免疫功能,同时也对雄性的睾丸等生殖腺有明显的抑制作用 

3.对特异性免疫的增强作用

特异性免疫是指有淋巴细胞参与的针对特定病原体的免疫反应,包括T淋巴细胞参与的细胞免疫和B淋巴细胞参与的体液免疫。

对体液免疫的增强作用

体液免疫是由B淋巴细胞介导的一种重要免疫反应,抗体效价的高低直接反映机体的体液免疫状态。中草药免疫增强剂能够促进抗体的产生,延缓抗体的下降或消失,从而增强体液免疫。毛小娟等(1989)从红芪和黄芪中提取得到的红芪多糖和黄芪多糖均可明显对抗强的松龙抑制血清凝集素、溶血素抗体的产生,黄芪多糖对抗体形成细胞的双向调节效果是它“扶正”的一种特征表现,黄芪多糖对抗体生成具有显著的促进作用 。向道斌等(1994)研究发现牛膝多糖能增强小鼠T、B淋巴细胞和巨噬细胞的功能,并可使血清总IgG和IgM水平显著提高 

周旭峰等(1997)用玉米花粉多糖水溶液直接稀释猪瘟疫苗,首免后7d高剂量组血清抗体OD值显著提高;首免后14d,高、低剂量组OD值均高于对照组;35d时高剂量组OD值仍显著高于对照组;并且30mg玉米花粉多糖就对猪瘟弱毒疫苗的免疫预防有良好的增强作用 

陈小波等(2002)对生长育肥猪分别添加中药(黄芪、当归、白芍、茯苓、贯众、使君子、大黄、甘草、柴胡加减提取物)、中药(同上述药物)+西药(阿散酸、杆菌肽锌、金霉素或喹乙醇),结果显著提高了不同阶段猪血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4的含量,提示中草药添加剂不仅促进生长育肥猪免疫球蛋白的生成,而且还促进补体的生成,从而改善了机体的体液免疫功能 。杨铁虹等(2005)指出,牛膝多糖能提高血清溶血素和脾脏内抗体形成的细胞数,提高血清免疫球蛋白IgG的水平 

江和基等(2006)在饲料中添加0.8%精制玉屏风散,仔猪的日增重、补体(C3、C4)和免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)含量均比其它组有显著提高;血清中淋巴细胞阳性率、白介素(IL-2)和γ-干扰素含量、T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8)数量均比对照组有显著提高(P<0.05),而CD4/CD8值有极显著提高,表明玉屏风散在一定程度上可以改善仔猪的生产性能,提高机体的免疫功能,是一个较为理想的免疫增强剂 

何正义等(2008)在杜长大杂种生长育肥猪基础饲粮中添加2%中药复方制剂(党参、炒白术、茯苓、炙甘草、黄芪各等份),60d试验结果表明能提高猪的生长性能,并能提高育肥猪血清中IgG、IgA、IgM的水平,从而增强免疫功能和抗病力 。张世昌等(2009)在仔猪饲粮中添加0.125%和0.25%复方中草药添加剂(主要由三棵针小檗碱、黄芪多糖、山揸黄酮和有机酸混合组成)饲喂35d,能降低仔猪腹泻率,提高血清IgG、IgA、IgM浓度和补体C3、C4含量,促进仔猪免疫器官发育,增强免疫功能,从而提高仔猪的生长性能。

对细胞免疫的增强作用

细胞免疫主要是由T淋巴细胞介导的一种重要免疫反应,中草药免疫增强剂能够促进淋巴细胞增殖、分化,促进细胞因子的分泌,提高T淋巴细胞百分率、E-玫瑰花环形成率,外周血淋巴细胞或脾细胞对植物血凝素、刀豆蛋白A或脂多糖等丝裂原刺激的转化能力,从而增强细胞免疫。

刘家国等(2000)测定了淫羊藿-蜂胶(以下简称淫-蜂)佐剂对4周龄和8周龄小鼠外周血中T淋巴细胞转化率的影响,结果4周龄小鼠T淋巴细胞转化率,淫-蜂佐剂( YF)组显著高于阴性对照( C)组、淫-蜂/环磷酰胺(YF/Cy)组和环磷酰胺(Cy)组( P<0.05),YF/ Cy组略低于C组,但此2组均显著高于Cy组 ( P<0.05);对于8周龄小鼠,除YF组与Cy组之间表现出明显差异( P<0.05)外,其他各组间均无显著差异( P >0.05)。表明淫-蜂佐剂不仅能提高外周血T淋巴细胞的转化率,而且可对抗环磷酰胺对T淋巴细胞活性的抑制作用,使受抑制的T淋巴细胞转化活性基本恢复正常,上述作用在幼鼠中表现尤其明显 

胡元亮等(2000)研究表明,淫-蜂佐剂不仅能显著提高4周龄小鼠和21、35日龄雏鸡的细胞免疫功能,有效地拮抗环磷酰胺的免疫抑制,并与其剂量和动物年龄有相关性 。毛晓峰等(2004)研究发现黄芪多糖能够提高免疫应激后断奶仔猪的细胞免疫功能,降低炎性因子和应激激素的分泌,从而发挥抗免疫应激作用 

王自然(2006)对仔猪注射猪瘟疫苗同时,以1%的中药免疫增强剂(由黄芪、党参、何首乌、淫羊藿、女贞子、白术、白芍、五味子、当归、鹿角胶、麦冬11味中草药组成)混饲,试验组猪瘟血清抗体效价显著高于对照组,而且试验组抗体产生的快,持续时间长;接种疫苗后15、45d,试验组T淋巴细胞百分率显著高于对照组。表明中药免疫增强剂具有促进T淋巴细胞的增殖和加强细胞免疫功能的作用,从而提高了机体的细胞免疫水平 。谢红兵等(2007)在断奶仔猪日粮中添加中草药(Ⅰ组由刺五加、黄芪、鱼腥草、甘草组成,Ⅱ组由绞股蓝、茵陈、板蓝根、甘草组成),与添加抗生素的对照组比较,在T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8方面差异均不显著,但显著能提高CD4/CD8的水平;分别提高T淋巴细胞阳性率6.9%和10.7% 

杨秀娟等(2008)在日粮中添加适量的复方中药制剂四君子汤加味,能显著提高仔猪血清IL-2水平、小肠黏膜上皮间淋巴细胞和杯状细胞数量,提高仔猪免疫力,缓解断奶应激 。赵娟等(2010)研究黄芪多糖对猪圆环病毒2型(PCV2)阳性猪免疫功能的调节作用,结果显示,黄芪多糖能显著增加外周血T淋巴细胞、NBT阳性细胞、CD4+T细胞百分数及IL-2、IL-4、IFN-γ含量,显著降低CD8+T细胞百分数,推测黄芪多糖通过上调CD4+细胞百分数、CD4+/CD8+及Th1反应恢复正常免疫机能。闫益波等(2012)采用兽用中草药免疫增强剂联合猪瘟疫苗接种2月龄仔猪,显著提高了猪血清中IgG和IgM的含量,同时T、B淋巴细胞增殖率显著提高,T淋巴细胞亚群比例(CD3+、CD4+、CD8+、CD3+/CD8+)也明显改善。

二、猪用中草药免疫增强剂的研究与应用进展

猪用中草药免疫增强剂在养猪业上的研究与应用报道逐年增多,普遍具有较好效果。冯昌荣(1987)用中药免疫促进剂“玉屏风散加味”煎煮或研末拌料喂仔猪或母猪试治仔猪白痢,167头病猪服药后2.5日内全部治愈 。郑旭升等(1993)通过PPA-ELlSA检测技术,证明党参、黄芪、白术、五味子、麦冬、淫羊藿、沙参等中药具有提高猪瘟免疫抗体OD值的作用,而且可延长抗体的存留时间 

童晓莉等(2002)在新荣Ⅰ系能繁母猪基础日粮中添加1%中药免疫增强剂,经过一个繁殖周期的试验,不仅能很好地维护肠道有益微生物群落的正常平衡,而且还能显著提高母猪妊期增重11.56%,猪成活率2.78%;极显著地提高仔猪20日龄重和35日龄重,降低仔猪腹泻频次25.9%,显著增加仔猪血液中红细胞和T细胞的数量。

马玉芳等(2003)在基础日粮中添加2种不同精制的中药饲料添加剂,均能有效地防止保育阶段的仔猪发生腹泻,改善生长性能,并能促进免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)、补体(C3、C4)和白细胞介素-2的生成,增强机体免疫功能 。张玉换等(2004)用研制的复方中草药高效免疫增强剂对猪群试验,结果试验组猪群的猪瘟抗体水平、日增重、死淘率、饲料报酬和经济效益均明显优于对照组,在3个试验组中,尤以1.5%添加量效果最佳,试验组日均增重比对照组提高30.75%,饲料转化率平均比对照组提高10.62个百分点,成活率平均比对照组提高13.3个百分点,头均千克增重成本比对照组降低26% 

边传周等(2005)在断奶仔猪日粮中添加黄芪多糖,断奶后第7、14d淋巴细胞百分数分别增加7.7%、18.2%;中性粒细胞百分数分别减少15.2%、28.6%;断奶仔猪的SRBC抗体效价分别提高0.47、1.49个滴度;单核细胞增殖率分别提高11%、25%;腹泻率显著低于28日龄断奶仔猪。张素梅等(2006)在断奶仔猪日粮中分别添加1%黄芪散剂及0.8%、1.0%和1.2%黄芪颗粒剂饲喂,对仔猪的生长性能及免疫功能均有不同程度的增强作用,免疫口蹄疫灭活苗后27d抗体水平显著高于对照组,腹泻率显著低于对照组,料重比均较对照组小 

曹国文等(2007)对杂交仔猪进行了芦荟多糖不同剂量与猪瘟活疫苗混合和分别注射免疫试验,混合注射组仅低剂量组(芦荟多糖为5mg/头猪)的猪瘟抗体滴度明显高于2个高剂量组(芦荟多糖为10mg/头猪组和20mg/头猪组)和疫苗对照组,而两个芦荟多糖高剂量组的猪瘟抗体滴度却低于疫苗对照组;当芦荟多糖与猪瘟活疫苗分别注射时,2个高剂量组均能显著促进和强化猪瘟抗体的产生,其增幅达到22.0%-30.0%,而低剂量组未能表现增效作用 

肖华丽等(2008)在基础日粮中添加0.05%复方免疫增强剂(由黄芪多糖和刺五加皂甙按1:1比例精制成),提高了仔猪的日增重,改善了日采食量和饲料利用率;提高了血浆γ-谷氨酰转肽酶、天门冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶和乳酸脱氢酶的活性;同时也促进了免疫球蛋白的生成和提高了血浆一氧化氮合酶活性 。萧琛文等(2008)发现在仔猪母源抗体较低时,注射口蹄疫疫苗后,抗体水平普遍升高;在疫苗中加入中药木鳖子提取物后,抗体的升高幅度加大,使抗体合格率起码增加10% 

邵珊等(2009)以黄芪多糖和白花蛇舌草多糖作为免疫增强剂联合猪高致病性繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫26日龄断奶仔猪,与生理盐水组比较,黄芪多糖和白花蛇舌草多糖均能极显著促进外周血淋巴细胞的增殖,使抗体提早产生并提高抗体滴度和IL-2表达水平;因此,黄芪多糖和白花蛇舌草多糖能增强猪对高致病性繁殖与呼吸综合征灭活疫苗的免疫应答能力。

张世昌等(2010)在断奶仔猪基础饲粮中添加0.125%和0.25%复方中草药提取物,35d试验结果表明,与对照组相比,两个试验组仔猪末重和平均日增重无显著影响,但均有提高的趋势;0.25%复方中草药组的仔猪生长性能最好,料重比和腹泻率显著降低;IgG、IgA含量均极显著高于对照组,补体C3、C4含量显著高于对照组;0.125%复方中草药组的IgA浓度显著高于对照组;免疫器官指数,0.25%复方中草药组的脾脏指数极显著高于对照组。可见复方中草药可以改善仔猪的生长性能,降低腹泻率,提高血清免疫球蛋白浓度、补体含量和仔猪免疫器官指数,具有增强仔猪免疫功能的作用 

帅起义等(2011)在80头母猪饲料中添加中药免疫增强剂(维康),具有增强免疫应答、提高母猪猪瘟疫苗免疫抗体水平的显著功效(p<0.05);还能显著提高母猪妊娠期增重(p<0.05),母猪繁殖性能也有显著改善,产仔数、产活仔数、初生窝重显著提高(p<0.05);仔猪成活率、断奶窝重也有改善趋势。俞向前等(2012)在断奶仔猪基础日粮中添加1.5%中药添加剂(党参、茯苓、山药、黄芪、莲子等21味中药),使用2个疗程(30d为1个疗程)后,可显著改善断奶仔猪淋巴细胞转化率,猪瘟和蓝耳病抗体检测合格率比对照组分别提高17%和19%,粪便虫卵记数减卵率为47%,表明中草药添加剂具有一定增强机体免疫力及抑制寄生虫卵的作用。
    王超峰等(2013)在21日龄断奶仔猪基础日粮中分别添加2×10-4、3×10-4、4×10-4黄芪多糖连续饲喂7d后用猪瘟弱毒疫苗免疫,检测结果显示黄芪多糖能提高仔猪外周血猪瘟抗体水平1个滴度以上,具有提高CD3+、CD4+T淋巴细胞百分数的趋势,说明黄芪多糖能提高仔猪特异性免疫力,是良好的免疫增强剂。

综上所述,猪用中草药免疫增强剂在养猪业上具有广阔的应用前景,应该结合中草药传统医药理论,利用现代高新技术,从中草药中筛选、分离、提取有效成分以及配伍合理的复方制剂,在整体水平、细胞水平及分子水平上,探讨单个中草药成分和多成分制剂的作用机理,研制开发出高效、稳定、无毒的中草药免疫增强剂,为实现绿色养猪业提供保障。

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